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Instrucciones de BioMax TranScreen
Preparación de muestras
Normalmente, las muestras que se preparan para la autorradiografía deben secarse completamente para minimizar la atenuación de la emisión beta. Al colocar una muestra o una mancha húmeda en una bolsa o en un envoltorio de plástico, se deteriora notablemente la precisión y la resolución, especialmente cuando se utilizan isótopos de energía baja (como el 35 S), por lo que se elimina por completo la detección eficaz de 3 H. Además, es importante que el material para el método utilizado en un experimento sea el que tenga una mayor afinidad con la biomolécula manchada (por ejemplo, nylon cargado positivamente para un ácido nucleico). La selección adecuada de la membrana garantiza que la radioactividad esté más cercana a la superficie (define un lado activo de la mancha), por lo que se puede acercar más a la película y al fósforo para maximizar la precisión y la resolución espacial.
Es importante garantizar que la mancha sea capaz de extraerse y de volver a sondarse después del secado para la autorradiografía. Normalmente, si las moléculas manchadas se entrecruzan adecuadamente en la membrana y la mancha se sonda y se bloquea adecuadamente, la extracción y el hecho de volver a sondar después del secado no afecta negativamente.
La definición operacional simple de aire seco es suficiente para utilizar con BioMax TranScreen, mientras que la humedad puede provocar adherencias importantes y/o problemas estáticos si se expone una mancha en la superficie de una película. La superficie BioMax TranScreen se resiste de forma eficaz a los efectos adversos que el agua y/o el hielo ocasionan normalmente en el fósforo.
Cuarto oscuro y luces de seguridad
IMPORTANTE: La película BioMax MS es extremadamente sensible a la luz verde, amarilla y azul y sólo debe exponerse al filtro de luz de seguridad roja GBX-2 de KODAK (sólo con bombilla de 7,5 a 15 vatios). El uso de otros filtros de luz de seguridad o de bombillas con una mayor energía provocará un aumento considerable en el velo de fondo de la película expuesta. Consulte las instrucciones y precauciones que se proporcionan con la película. BioMax TranScreen es resistente a la exposición de luz durante periodos indefinidos de tiempo. Además, el periodo de tiempo de la emisión de luz que transcurre después de la exposición de fósforo es suficientemente breve (segundos) como para que no existan precauciones especiales relacionadas con la adaptación a la oscuridad de la pantalla.
Instrucciones acerca del uso del sistema BioMax TranScreen de KODAK
PASO 1.
Siempre que se den las condiciones adecuadas en el cuarto oscuro, retire la película de la caja e introdúzcala en la plegadora BioMax TranScreen. La plegadora BioMax TranScreen está diseñada para ayudarle a minimizar el velado de la película cuando las condiciones en el cuarto oscuro no son las adecuadas. Consulte la sección de cuarto oscuro y de luz de seguridad para obtener información acerca de las condiciones adecuadas del cuarto oscuro.
PASO 2.
Coloque el lado activo de la muestra en la superficie de fósforo de la plegadora, tal y como se muestra en el diagrama.
PASO 3.
Coloque la combinación película/pantalla en un cassette y cierre el cassette.
PASO 4.
A continuación, debe colocar el cassette en un congelador (de -60 a -80 °C). Es importante utilizar el congelador para maximizar la precisión del sistema.
PASO 5.
Después de la exposición, deje que se caliente el cassette a la temperatura ambiente durante al menos 15 minutos antes de abrirlo. Esto le ayudará a evitar que se dañe la bisagra del cassette y minimiza la condensación de agua que se forma en la película expuesta, en la muestra y en la pantalla BioMax TranScreen.
PASO 6. Con las condiciones adecuadas en el cuarto oscuro, abra el cassette y desmonte el sándwich construido. La plegadora BioMax TranScreen se marca en una esquina para facilitar el acceso a la película.
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